D53 Spectroscopie métabolique

Topique

Cette même spectroscopie métabolique analyse, de manière générale, la composition chimique interne finale d'un insecte — cet insecte même qui sert de modèle à un autre système — afin de quantifier précisément chaque métabolite énergétique, ainsi que les mêmes glucides et lipides qui constituent un autre modèle distinct de ce système concernant l'oxydation biologique. Elle analyse également chaque intermédiaire final de son cycle de Krebs et chaque produit final d'un stress particulier subi par cet insecte.

Par ailleurs, cette même spectrophotométrie ultraviolet-visible quantifie chaque métabolite coloré ou chaque métabolite absorbant la lumière de cet insecte, selon la même loi de Beer-Lambert qui constitue un autre modèle de ce système concernant l'absorption du rayonnement électromagnétique — la même loi qui sert également de modèle distinct à ce système concernant le dioxyde de carbone.

La résonance magnétique nucléaire (RMN), quant à elle, est la méthode la plus informative sur le plan structural de toute cette spectroscopie métabolique : chaque métabolite de cet insecte possède, par conséquent, son propre déplacement chimique final unique qui l’identifie, et l’intégrale finale de ce pic est donc proportionnelle à sa concentration spécifique au sein de cet insecte. Une concentration plus élevée de ce métabolite particulier au sein de cet insecte se traduit par une intégrale finale encore plus élevée de ce pic de RMN.

Cette même analyse des flux métaboliques, utilisant le marquage isotopique du même carbone déjà établi dans ce document, constitue, à son tour, la technique la plus avancée de toute cette spectroscopie métabolique : cet insecte est nourri avec le même glucose, tel qu’établi dans un autre modèle de cet ensemble, marqué isotopiquement à des positions spécifiques, et la distribution de ce marquage parmi chaque métabolite de cet insecte est suivie, révélant à la fois le flux net final et le flux d’échange final de chaque enzyme particulière de cet insecte. Le fait que ce marquage isotopique du glucose administré à l'insecte se répartisse encore plus rapidement entre ces métabolites signifie que, par conséquent, le flux net final de cette enzyme particulière est révélé avec une plus grande précision.

Cette même chromatographie, qu'il s'agisse de chromatographie liquide à haute performance ou de chromatographie en phase gazeuse, sépare et quantifie chaque métabolite individuel au sein d'un extrait tissulaire spécifique de ce même insecte.

Ainsi, ce modèle, avec sa composition chimique interne d'un insecte et les mêmes métabolites énergétiques initiaux, permet à cette même spectrométrie de masse, couplée à cette même chromatographie, de combiner la séparation chromatographique finale décrite au début de ce paragraphe et l'identification finale de chaque métabolite par sa masse moléculaire. Il en résulte un profil métabolomique final complet, avec un grand nombre de ces mêmes métabolites énergétiques et intermédiaires du cycle de Krebs identifiés simultanément au sein de ce même insecte. Le fait que cette spectrométrie de masse, couplée à cette chromatographie, identifie simultanément un nombre encore plus important de ces métabolites rend ce profil métabolomique final de cet insecte encore plus complet.

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